Среда «ГибриС-1-CHO»

Бессывороточная среда «ГибриС-1-CHO»

Продукт является разработкой ООО НПП «ПанЭко». Среда представляет собой изотонический раствор солей, аминокислот, витаминов и глюкозы, приготовленный в очищенной деионизованной воде, стерилизованный фильтрацией через 0,2 мкм PES-фильтры. Среда имеет химически-определенный состав и не содержит продуктов животной или растительной природы.

Базовая рецептура среды не включает источники глутамина и нуклеотиды. Для обеспечения роста некомплементированных DHFR или GS-мутантов, необходимо экзогенно ввести в ее состав предшественники нуклеотидов в форме Гипоксантин/Тимидин (НТ) и/или Глутамин (Аланил-Глутамин).

Среда представляет собой прозрачный раствор желтого цвета, без опалесценции и осадка. Не содержит антибиотиков.

Содержание белка менее 10 мг/л.

рН: от 7,0 до 7,4
Осмолярность: 320+20 мосмоль/кг
Буферная ёмкость: не менее 6,0 мл

Упаковка: 450 мл среды в ПЭТ флаконах

СРОК ГОДНОСТИ: 1 год.

УСЛОВИЯ ХРАНЕНИЯ: Хранить при температуре от +2 С до +8 С в защищённом от света месте.

НАЗНАЧЕНИЕ: Среда «ГибриС-1-CHO» предназначена для суспензионного культивирования и продукции рекомбинантных белков клетками генноинженерных линий CHO.

СПОСОБ ПРИМЕНЕНИЯ: Флаконы со средой вскрывать в стерильных условиях. Перед использованием необходимо ввести источник глутамина (рекомендован аланил-глутамин) в концентрации 4-6мМ. Для ускорения процессов накопления биомассы и инициации синтеза целевого продукта среду обогащают введением раствора Гипоксантина/Тимидина (НТх50, Кат.Ф050:ПанЭко) до финальной концентрации в среде 1,0-1,5 х.

АДАПТАЦИЯ КЛЕТОК: Линии клеток, культивируемые с использованием классических (сывороточных) сред требуют адаптации при переходе к бессывороточным условиям культивирования. Время периода адаптации определяется опытным путём для конкретной линии клеток.

Адаптация может проводиться 2 способами:

Быстрый способ: осуществляется путём одномоментного перевода адаптируемой культуры в бессывороточную среду. Первый пассаж клеток осуществляется в середине логарифмической фазы роста в концентрации от 1х105 кл/мл.

Ступенчатый способ: осуществляется путём последовательного пассирования клеток на БС, содержащих 2%, а затем 0,5% сыворотки с последующим переводом культуры на БС. Начальная концентрация в суспензии — от 5х104 кл/мл.

В каждом случае адаптация культуры к БС продолжается до тех пор, пока не произойдёт стабилизация показателей клеточного роста (изоморфности культуры клеток, кривой роста, индекса пролиферации, времени удвоения).