Добавка НейроМакс, 50-кратная, стер.
Данный продукт рекомендован для исследовательских целей.
Назначение
Продукт используется для оптимизации базовых рецептур сред, предназначенных для поддерживающего культивирования клеток нервной ткани центральной и периферической нервной системы. Отмечена эффективность Добавки В-27 в процессах длительного культивирования нейронов гиппокампа и ретинальных ганглиев. Область применения: нейробиология, биомедицинские исследования.
Рекомендуемая основа среды для оптимизации: Нейробазальная (Neurobasal™ Medium).
Основные характеристики изделия
Не содержит сыворотки. Содержит витамины, антиоксиданты, гормоны, липиды, альбумин, инсулин, трансферрин.
Поддерживаемые культуры клеток нейронального происхождения:
Эмбриональные и пренатальные нейробласты и прогениторы;
Нейроны нервной ткани взрослого человека;
Первичные культуры опухолевых клеток и постоянные клеточные линии опухолевых тканей нервной системы;
Эмбриональные нейроны полосатого тела и среднего мозга крысы (EGF-стимулированная прогрессия роста).
Протокол применения
Одного флакона продукта (10 мл) достаточно для сапплементации 500 мл оптимизируемой среды. Перед использованием, продукт размораживают в течение ночи при 4° С.
Описанная процедура тестирования была применена с целью культивирования нейронов гиппокампа и коры мозга 18-дневного эмбриона крысы, а также клеточных линий нейробластомы.
Покрыть поверхность культуральной емкости адгезивом: стерильный водный раствор поли-D-лизина 0,05 мг/мл из расчета 0,15 мл/см2 (выдержать 1 час при комнатной температуре).
Удалить раствор адгезива и дважды ополоснуть поверхность стерильной деионизованной водой. Полностью подсушить емкости в ламинарном шкафу. Использовать сразу или хранить в холодильнике до 2 недель.
Изолировать первичные нейроны крысы или использовать культуру замороженных нейронов согласно стандартным лабораторным протоколам.
Осуществить пассаж клеток в преинкубированной или прогретой при 37° С полной среде Нейробазальная. Рекомендуемая плотность пассажа ~160 кл./см2. (Для нейронов гиппокампа используется полная среда с добавлением 25 мкМ L-Глутамата).
Инкубировать сосуды 37° С в стандартных условиях СО2-инкубатора, однако, предпочтительно снижение парциального содержания кислорода до 9% .
Через 4-24 часа заменить ½ среды свежей.
В случае негиппокампальной культуры нейронов: через 4 дня после пассажа заменить ½ среды свежей. Для гиппокампальной культуры нейронов: через 3 дня после пассажа заменить ½ среды свежей без L-глутамата. С периодичностью в 3 дня повторять процедуру. (Введение 25 мкМ 2-меркаптоэтанола увеличивает выживаемость и сроки культивирования нейронов гиппокампа in vitro).
Срок годности 2 года.
Условия хранения и транспортировки:
Хранить при температуре -10…-20° С в защищенном от света месте. Транспортировать с использованием морозильного оборудования или термоконтейнера.
